Energy values and protein digestibility of soybean milk by-product in pigs based on in vitro assays / Valores energéticos y digestibilidad proteica del subproducto de la leche de soja en cerdos con base en ensayos in vitro / Valores energéticos e digestibilidade protéica do subproduto do leite de soja em suínos com base em ensaios in vitro

Abstract Background: Soybean milk by-product (SMBP) is a potential alternative feed ingredient in swine diets due to its high protein content. However, information on energy and nutritional values of SMBP used as swine feed ingredient is limited. Objective: To estimate energy values and protein digestibility of SMBP in pigs based on in vitro assays. Methods: Four SMBP samples were obtained from 3 soybean milk-producing facilities. In vitro total tract disappearance (IVTTD) and in vitro ileal disappearance (IVID) of dry matter (DM) in the SMBP samples were determined. In vitro ileal disappearance of crude protein was determined by analyzing crude protein content in undigested residues after determining IVID of DM. Digestible and metabolizable energy of SMBP were estimated using gross energy, IVTTD of DM, and prediction equations. Results: Sample 4 had greater IVTTD of DM than that of sample 3 (97.7 vs. 94.4%, p<0.05), whereas IVID of DM in sample 4 was lower compared with sample 1 (53.5 vs. 65.0%, p<0.05). In vitro ileal disappearance of crude protein in sample 2 was greater than that in sample 1 and 3 (92.6 vs. 90.6 and 90.1%; p<0.05). The estimated metabolizable energy of SMBP ranged from 4,311 to 4,619 kcal/kg as-is basis and the value of sample 3 was the least (p<0.05) among SMBP samples. Conclusion: Energy values and protein digestibility should be determined before using SMBP in swine diets.

Resumen Antecedentes: El subproducto de la leche de soja (SMBP) es un ingrediente alimenticio alternativo con uso potencial en dietas porcinas dado su alto contenido de proteína. Sin embargo, la información sobre sus valores energéticos y nutricionales para alimentación de cerdos es muy limitada. Objetivo: Estimar los valores de energía y la digestibilidad de la proteína del SMBP en cerdos con base en ensayos in vitro. Métodos: Se obtuvieron cuatro muestras de SMBP de tres empresas productoras de leche de soja. Se determinaron la desaparición de tracto total in vitro (IVTTD) y la desaparición ileal in vitro (IVID) de la materia seca (DM) en las muestras de SMBP. La desaparición ileal in vitro de proteína cruda se determinó analizando el contenido de proteína cruda en residuos no digeridos después de determinar la IVID de la DM. La energía digestible y metabolizable de SMBP se estimó utilizando la energía bruta, IVTTD de la DM y ecuaciones de predicción. Resultados: La muestra 4 tuvo una mayor IVTTD de la DM que la muestra 3 (97,7 vs. 94,4%, p<0,05), mientras que la IVID de la DM en la muestra 4 fue menor en comparación con la muestra 1 (53,5 vs. 65,0%, p<0,05). La desaparición ileal in vitro de la proteína cruda en la muestra 2 fue mayor que la de las muestras 1 y 3 (92,6 vs. 90,6 y 90,1%; p<0,05). La energía metabolizable estimada de SMBP varió de 4.311 a 4.619 kcal/kg (en base húmeda) y el valor de la muestra 3 fue el menor (p<0.05) entre las muestras de SMBP. Conclusión: Los valores de energía y la digestibilidad de la proteína deben determinarse antes de usar el SMBP en dietas porcinas.

Resumo Antecedentes: O subproduto do leite de soja (SMBP) é um potencial ingrediente alternativo na dieta de suínos, considerando seu alto teor de proteínas. No entanto, as informações sobre os valores energéticos e nutricionais do SMBP usado como ingrediente alimentar para suínos são limitadas. Objetivo: Estimar valores energéticos e digestibilidade protéica do SMBP em suínos com base em ensaios in vitro. Métodos: Foram obtidas quatro amostras de SMBP de três instalações produtores de leite de soja. Foram determinados o desaparecimento total do trato in vitro (IVTTD) e o desaparecimento ileal in vitro (IVID) da matéria seca (DM) nas amostras de SMBP. O desaparecimento ileal in vitro da proteína bruta foi determinado pela análise do conteúdo de proteína bruta em resíduos não digeridos após a determinação da IVID do DM. A energia digerível e metabolizável do SMBP foi estimada usando energia bruta, IVTTD do DM e equações de predição. Resultados: a amostra 4 apresentou maior IVTTD de DM do que a amostra 3 (97,7 vs. 94,4%, p<0,05) enquanto a IVID do DM na amostra 4 foi menor em comparação com a amostra 1 (53,5 vs. 65,0%, p<0,05). O desaparecimento ileal in vitro da proteína bruta na amostra 2 foi superior ao da amostra 1 e 3 (92,6 vs. 90,6 e 90,1%; p<0,05). A energia metabolizável estimada do SMBP variou de 4.311 a 4.619 kcal/kg no estado em que se encontra e o valor da amostra 3 foi o menor (p<0,05) entre as amostras do SMBP. Conclusão: os valores energéticos e a digestibilidade das proteínas devem ser determinados antes do uso do SMBP nas dietas suínas.

In vitro acaricidal activity of different ectoparasiticide classes against Amblyomma sculptum larvae / Atividade acaricida in vitro de diferentes classes de ectoparasiticidas frente a larvas de Amblyomma sculptum

Abstract Zoonoses are major causes of morbidity and mortality worldwide. Among them, Brazilian Spotted Fever (BSF) is an important one that occurs in some regions of South America and can be transmitted by the "star tick" Amblyomma sculptum. Application of acaricides against the larval stage is important as strategy of population control. However, there is still a deficiency of studies on chemical control of A. sculptum and the present work aims to evaluate the in vitro acaricidal activity of cypermethrin, flumethrin, deltamethrin, fipronil, coumaphos and chlorpyrifos against A. sculptum larvae. Bioassays were performed using the larval immersion test method. A discriminatory analysis between the antiparasitic classes most used for tick control was carried out, which made it possible to determine the classes with higher potential for controlling A. sculptum larvae. Our results showed that A. sculptum larvae present highest sensitivity to the synthetic pyrethroid group, followed by the phenylpyrazole, organophosphate and macrocyclic lactone groups. These findings may support studies on improvement of tick control as in animals as in the environment.

Resumo As zoonoses são a maior causa de morbidade de mortalidade no mundo. A Febre Maculosa Brasileira (FMB) é uma importante zoonose que ocorre em algumas regiões da América do Sul e pode ser transmitida pelo "carrapato-estrela" Amblyomma sculptum. A aplicação de acaricidas, frente ao estágio larval, é importante como estratégia no controle da população. No entanto, ainda há uma deficiência de estudos para o controle químico de A. sculptum. Devido à necessidade de mais informações sobre o controle de A. sculptum, o presente trabalho tem como objetivo avaliar a atividade acaricida in vitro de cipermetrina, flumetrina, deltametrina, fipronil, coumafós e clorpirifós frente a larvas de A. sculptum. Os bioensaios foram realizados pelo método Teste de Imersão de Larva. Foi realizada uma análise discriminatória entre as classes antiparasitárias mais utilizadas para controle de carrapatos, possibilitando determinar classes com maior potencial para o controle de larvas de A. sculptum. Os resultados deste trabalho mostraram que as larvas de A. sculptum apresentam maior sensibilidade ao grupo dos piretroides sintéticos, seguido pelos grupos fenilpirazóis, organofosforados e lactonas macrocíclicas. Esses achados poderiam apoiar estudos visando ao controle do carrapato tanto em animais quanto no meio ambiente.

Eficiência de suco de juçara e manga na veiculação de Lactobacillus rhamnosus GG ao trato gastrointestinal humano simulado por ensaio in vitro / Efficiency of juçara and mango juice in the delivery of Lactobacillus rhamnosus GG to the human gastrointestinal tract simulated by in vitro assay

Este trabalho avaliou a interferência do estresse subletal em pH ácido na sobrevivência de Lactobacillus rhamnosus GG em suco misto de juçara e manga com pH ajustado para 3,0 e 3,5 e a resistência desta bactéria ao trato gastrointestinal simulado in vitro durante 28 dias de armazenamento a 6,0 °C. O estresse ácido previamente aplicado nas células de L. rhamnosus GG não aumentou sua resistência ao trato gastrointestinal simulado in vitro e a bactéria apresentou viabilidade mínima de 3,89 Log UFC/mL após a passagem pela fase entérica II. Os tratamentos utilizados, bem como o tempo de armazenamento, não influenciaram (p>0,05) na viabilidade de L. rhamnosus GG. Portanto, o estresse ácido subletal aplicado não se mostrou eficaz no aumento da sobrevivência da bactéria até 28 dias de armazenamento, mas a mesma apresentou boa sobrevivência no suco em pH ácido, mesmo quando não submetida ao estresse prévio em pH 4,0 por 1 hora a 37 °C.

This work evaluated the interference of sublethal stress at acidic pH in the survival of Lactobacillus rhamnosus GG in mixed jussara and mango juice with pH adjusted to 3,0 and 3,5, and the resistance of this bacterium to the gastrointestinal tract simulated in vitro during 28 days of storage at 6.0 °C. The acid stress previously applied to the cells of L. rhamnosus GG did not increase its resistance to the simulated gastrointestinal tract in vitro and thebacterium had a minimum viability of 3.89 Log CFU/mL after passage through the enteric phase II. The treatments used, as well as the storage time, did not influence (p>0.05) the viability of L. rhamnosus GG. Therefore, the sublethal acid stress applied was not effective in increasing the survival of the bacteria until 28 days of storage, but it presented good survival in the juice at acid pH, even when not submitted to previous stress at pH 4.0 per 1 hour at 37 °C.

Estabelecimento e caracterização de linhagens celulares infectadas pelo vírus linfotrópico de célula T humana do tipo I (HTLV-I)

O vírus linfotrópico de célula T humana do tipo I (HTLV-I) está associado etiologicamente ao desenvolvimento da leucemia da célula T do adulto (LTA) e da paraparesia espástica tropical/mielopatia associada ao HTLV-I (PET/MAH). O objetivo deste trabalho foi estabelecer linhagens celulares infectadas pelo HTLV-I e caracterizá-las quanto a: a) morfologia, b) tipo celular, c) proliferação contínua sem adição de fatores de crescimento, d) demonstrar a presença do DNA proviral integrado ao genoma das células das linhagens, e) caracterizar esta integração, f) verificar a expressão de partículas virais, g) expressão de citocinas e finalmente, h) avaliar o efeito de imunossupressores na proliferação celular. Estabelecemos três linhagens infectadas pelo HTLV-I a partir de células mononucleares de pacientes portadores de LTA. Não foi utilizada a técnica de co-cultivo com células não infectadas. As culturas apresentam células dismórficas, bi e multinucleadas com figuras de mitose, uma das linhagens manteve o fenótipo de célula T, enquanto que nas duas outras não foi possível caracterizar o tipo celular predominante, tendo havido perda de todos os marcadores de superfície, e não se conseguiu demonstrar rearranjo da cadeia g do TCR. Caracterizou-se a cepa de HTLV-I em relação à seu subtipo, sendo uma cepa Cosmopolita B, mais freqüente no Japão, local de origem do paciente doador das células e as duas outras do subtipo Cosmopolita A, cepa comum em várias regiões do Globo. Demonstrou-se haver dois clones celulares nas linhagens através do estudo do local de integração do DNA proviral, entretanto não podemos afastar a possibilidade de ser um único clone com dois DNAs provirais integrados. A expressão tanto de proteínas como de partículas virais não foi significativa, somente em uma linhagem conseguiu-se mostrar partículas virais por contrastação negativa em microscopia eletrônica. As linhagens expressam de forma constitutiva três citocinas IL-10, IL-15 e IFN-g com intensidade variável. E finalmente, as três linhagens foram resistentes à ação da Ciclosporina A. O estabelecimento destas linhagens possibilitará o estudo das vias de ativação alteradas pela infecção, assim como servirão de modelo experimental terapêutico para o ensaio in vitro de novas drogas.

The human T-cell type lymphotropic virus human type I (HTLV-I) is etiologically associated to two main diseases: a malignant one, the adult T-cell leukemia (ATL) and to a progessive myelopathy, tropical spastic paraparesis/HTLV-I- associated myelopathy (TSP/HAM). The objectives of this work were the establishment of HTLV-I-infected cell lines and the analysis of these lines in the following aspects: a) morphology, b) cellular phenotype, c) continuous proliferation without exogenous growth factors, d) presence of integrated HTLV-I DNA provirus; e) the type of integration (mono, oligo or policlonal) as well as the HTLV-I subtype, f) expression of viral proteins as well as viral particles, g) expression of cytokines; and finally h) evaliation of Cyclosporin A effect on the proliferation of the lines. We established three HTLV-I transformed cell lines. We established three HTLV-I transformed cell lines. The cells are large and dimorphic, showing two or multiple nucleus; one cell line remainde with the T cell phenotype. It was not possible to characterize the two others, due to the loss of their surface markers and, it was not possible to demonstrate the TCR g chain rearrangement. Concerning the HTLV-I subtype strain, one of the cell lines harbours the Cosmopolitan B subtype, which is more frequent in Japan, the place of origin of the cells’ donor. The other two cell lines are the Cosmopolitan A subtype, common in many regions around the world. Concerning provirus integration, the cell lines are oligoclonal. We were able to demonstrate two cellular clones in the lines by study of the local site of integration, but can not exclude the possibility to be just one clone with two proviral DNAs. The viral proteins as well as viral particles were not significantly expressed. Only one cell line showed viral particles in the negative staining technique on electronic microscopy. The three cell lines constitutively express, with variable intensity, the following citokines: IL-10, IL-15 e IFN-g. The infected cells proliferated even in the presence of 1 mg/ml of Cyclosporine A. The establishment of these cells will provide a helpful tool for the study of the activation pathways altered by the infection as well as an experimental model for therapeutic drugs assays.